Bedankt voor uw bezoek aan Nature.com. De browserversie die u gebruikt, biedt beperkte ondersteuning voor CSS. Voor het beste resultaat raden we u aan een nieuwere versie van uw browser te gebruiken (of de compatibiliteitsmodus in Internet Explorer uit te schakelen). Om de ondersteuning te blijven garanderen, wordt de site in de tussentijd zonder opmaak of JavaScript weergegeven.
Microbiële groei in wonden manifesteert zich vaak als biofilms, die de genezing belemmeren en moeilijk te verwijderen zijn. Nieuwe zilververbanden beweren wondinfecties te bestrijden, maar hun antibiofilmwerking en infectie-onafhankelijke genezende effecten zijn over het algemeen onbekend. Met behulp van in vitro en in vivo biofilmmodellen van Staphylococcus aureus en Pseudomonas aeruginosa rapporteren we de effectiviteit van Ag1+-ionengenererende verbanden; Ag1+-verbanden die ethyleendiaminetetraazijnzuur en benzethoniumchloride bevatten (Ag1+/EDTA/BC), en verbanden die zilvernitraat bevatten (Ag-oxysalten), die Ag1+, Ag2+ en Ag3+-ionen produceren om wondbiofilm en het effect ervan op de genezing te bestrijden. Ag1+-verbanden hadden minimale effecten op wondbiofilm in vitro en bij muizen (C57BL/6j). Daarentegen verminderden geoxygeneerde zilverzouten en Ag1+/EDTA/BC-verbanden het aantal levensvatbare bacteriën in biofilms in vitro aanzienlijk en lieten ze een significante reductie zien van bacteriële en EPS-componenten in biofilms in muizenwonden. Deze verbanden hadden verschillende effecten op de genezing van met biofilm geïnfecteerde en niet-geïnfecteerde wonden. Verbanden met geoxygeneerde zouten hadden gunstigere effecten op re-epithelialisatie, wondgrootte en ontsteking in vergelijking met controlegroepen en andere zilververbanden. De verschillende fysisch-chemische eigenschappen van zilververbanden kunnen verschillende effecten hebben op wondbiofilms en wondgenezing, en hiermee moet rekening worden gehouden bij de keuze van een verband voor de behandeling van met biofilm geïnfecteerde wonden.
Chronische wonden worden gedefinieerd als “wonden die niet op een ordelijke en tijdige manier de normale genezingsstadia doorlopen” 1. Chronische wonden vormen een psychologische, sociale en economische last voor patiënten en het gezondheidszorgsysteem. De jaarlijkse uitgaven van de NHS aan de behandeling van wonden en bijbehorende comorbiditeiten worden geschat op £8,3 miljard in 2017–182. Chronische wonden vormen momenteel ook een urgent probleem in de Verenigde Staten, waar Medicare de jaarlijkse kosten voor de behandeling van patiënten met wonden schat op $28,1–$96,8 miljard3.
Infectie is een belangrijke factor die wondgenezing belemmert. Infecties manifesteren zich vaak als biofilms, die aanwezig zijn in 78% van de chronische wonden die niet genezen. Biofilms ontstaan wanneer micro-organismen zich onomkeerbaar hechten aan oppervlakken, zoals wondoppervlakken, en kunnen aggregeren tot gemeenschappen die extracellulaire polymeren (EPS) produceren. Wondbiofilm wordt geassocieerd met een verhoogde ontstekingsreactie die leidt tot weefselschade, wat de genezing kan vertragen of belemmeren⁴. De toename van weefselschade kan gedeeltelijk te wijten zijn aan een verhoogde activiteit van matrixmetalloproteïnasen, collagenase, elastase en reactieve zuurstofsoorten⁵. Bovendien verbruiken ontstekingscellen en biofilms zelf veel zuurstof en kunnen daardoor lokale weefselhypoxie veroorzaken, waardoor cellen de essentiële zuurstof die nodig is voor effectief weefselherstel, verliezen⁶.
Volwassen biofilms zijn zeer resistent tegen antimicrobiële middelen, waardoor agressieve strategieën nodig zijn om biofilminfecties te bestrijden, zoals mechanische behandeling gevolgd door een effectieve antimicrobiële behandeling. Omdat biofilms zich snel kunnen regenereren, kunnen effectieve antimicrobiële middelen het risico op hernieuwde vorming na chirurgische debridement verminderen7.
Zilver wordt steeds vaker gebruikt in antimicrobiële verbanden en wordt vaak als eerstelijnsbehandeling ingezet bij chronisch geïnfecteerde wonden. Er zijn veel commercieel verkrijgbare zilververbanden, elk met een andere zilversamenstelling, concentratie en basismatrix. Vooruitgang in zilververbanden heeft geleid tot de ontwikkeling van nieuwe zilververbanden. De metallische vorm van zilver (Ag0) is inert; om antimicrobiële werking te bereiken, moet het een elektron verliezen om ionisch zilver (Ag1+) te vormen. Traditionele zilververbanden bevatten zilververbindingen of metallisch zilver die, wanneer ze in contact komen met vloeistof, ontbinden tot Ag1+-ionen. Deze Ag1+-ionen reageren met de bacteriële cel en onttrekken elektronen aan structurele componenten of cruciale processen die nodig zijn voor overleving. Gepatenteerde technologie heeft geleid tot de ontwikkeling van een nieuwe zilververbinding, zilveroxyzouten (zilvernitraat, Ag7NO11), die in wondverbanden wordt verwerkt. In tegenstelling tot traditioneel zilver produceert de ontbinding van zuurstofhoudende zouten zilvertoestanden met een hogere valentie (Ag1+, Ag2+ en Ag3+). In vitro-onderzoeken hebben aangetoond dat lage concentraties geoxygeneerde zilverzouten effectiever zijn dan enkelvoudig zilverion (Ag1+) tegen pathogene bacteriën zoals Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus en Escherichia coli8,9. Een ander nieuw type zilververband bevat extra ingrediënten, namelijk ethyleendiaminetetraazijnzuur (EDTA) en benzethoniumchloride (BC), waarvan wordt beweerd dat ze zich richten op EPS in biofilms en daardoor de penetratie van zilver in de biofilm vergroten. Deze nieuwe zilvertechnologieën bieden nieuwe manieren om wondbiofilms aan te pakken. Het is echter belangrijk om de impact van deze antimicrobiële middelen op het wondmilieu en infectie-onafhankelijke genezing te onderzoeken om ervoor te zorgen dat ze geen ongunstig wondmilieu creëren of de genezing vertragen. Er zijn zorgen geuit over in vitro cytotoxiciteit van zilver bij verschillende zilververbanden10,11. In vitro cytotoxiciteit heeft zich echter nog niet vertaald in in vivo toxiciteit, en verschillende Ag1+-verbanden hebben een goed veiligheidsprofiel aangetoond12.
In deze studie onderzochten we de effectiviteit van carboxymethylcelluloseverbanden met nieuwe zilverformuleringen tegen wondbiofilm in vitro en in vivo. Daarnaast werden de effecten van deze verbanden op immuunreacties en wondgenezing, onafhankelijk van infectie, beoordeeld.
Alle gebruikte verbanden waren commercieel verkrijgbaar. 3M Kerracel Gel Fiber Dressing (3M, Knutsford, VK) is een niet-antimicrobieel verband van 100% carboxymethylcellulose (CMC) gelvezels dat in dit onderzoek als controleverband werd gebruikt. Drie antimicrobiële CMC-zilververbanden werden geëvalueerd, namelijk 3M Kerracel Ag dressing (3M, Knutsford, VK), dat 1,7 gewichtsprocent geoxideerd zilverzout (Ag7NO11) bevat in zilverionen met een hogere valentie (Ag1+, Ag2+ en Ag3+). Tijdens de ontleding van Ag7NO11 worden Ag1+, Ag2+ en Ag3+ ionen gevormd in een verhouding van 1:2:4. Aquacel Ag Extra-verband met 1,2% zilverchloride (Ag1+) (ConvaTec, Deeside, VK) 13 en Aquacel Ag + Extra-verband met 1,2% zilverchloride (Ag1+), EDTA en benzethoniumchloride (ConvaTec, Deeside, VK) 14.
De in dit onderzoek gebruikte stammen waren Pseudomonas aeruginosa NCTC 10781 (Public Health England, Salisbury) en Staphylococcus aureus NCTC 6571 (Public Health England, Salisbury).
Bacteriën werden een nacht gekweekt in Muller-Hinton-bouillon (Oxoid, Altrincham, VK). De nachtcultuur werd vervolgens 1:100 verdund in Muller-Hinton-bouillon en 200 µl werd uitgeplaat op steriele 0,2 µm Whatman Cyclopore-membranen (Whatman plc, Maidstone, VK) op Muller-Hinton-agarplaten (Sigma-Aldrich Company Ltd, Kent, Groot-Brittannië). Koloniale biofilmvorming werd gedurende 24 uur bij 37 °C uitgevoerd. Deze koloniale biofilms werden getest op logaritmische krimp.
Snijd het verband in vierkante stukjes van 3 cm² en bevochtig deze vooraf met steriel gedemineraliseerd water. Plaats het verband over de biofilm van de kolonie op de agarplaat. Elke 24 ha biofilm werd verwijderd en het aantal levensvatbare bacteriën in de biofilm (CFU/ml) werd gekwantificeerd door seriële verdunning (10⁻¹ tot 10⁻⁷) in Day-Angle neutralisatiebouillon (Merck-Millipore). Na 24 uur incubatie bij 37 °C werden standaard plaatbepalingen uitgevoerd op Mueller-Hinton agarplaten. Elke behandeling en elk tijdstip werd in drievoud uitgevoerd en de plaatbepalingen werden voor elke verdunning herhaald.
Varkensbuikhuid werd verkregen van vrouwelijke Large White-varkens binnen 15 minuten na de slacht, conform de exportnormen van de Europese Unie. De huid werd geschoren en gereinigd met alcoholdoekjes, waarna deze 24 uur lang werd ingevroren bij -80 °C om de vitaliteit van de huid te verminderen. Na het ontdooien werden stukjes huid van 1 cm² driemaal gewassen met PBS, 0,6% natriumhypochloriet en 70% ethanol, telkens gedurende 20 minuten. Voordat de opperhuid werd verwijderd, werd eventuele resterende ethanol verwijderd door driemaal te wassen met steriele PBS. De huid werd gekweekt in een 6-wells plaat met een 0,45 μm dik nylonmembraan (Merck-Millipore) en 3 absorberende pads (Merck-Millipore) met 3 ml foetaal runderserum (Sigma) aangevuld met 10% Dulbecco's Modified Eagle Medium (Dulbecco's Modified Eagle Medium – Aldrich Ltd.).
Koloniale biofilms werden gekweekt zoals beschreven voor biofilm-blootstellingsstudies. Na 72 uur kweken van de biofilm op het membraan werd de biofilm met een steriele entnaald op het huidoppervlak aangebracht en werd het membraan verwijderd. De biofilm werd vervolgens nog 24 uur bij 37 °C op de dermis van het varken geïncubeerd om de biofilm te laten rijpen en aan de huid te laten hechten. Nadat de biofilm was gerijpt en gehecht, werd een verband van 1,5 cm², vooraf bevochtigd met steriel gedestilleerd water, direct op het huidoppervlak aangebracht en 24 uur bij 37 °C geïncubeerd. Levensvatbare bacteriën werden zichtbaar gemaakt door kleuring met PrestoBlue cellevensvatbaarheidsreagens (Invitrogen, Life Technologies, Paisley, VK) gelijkmatig aan te brengen op het apicale oppervlak van elk explantaat en dit 5 minuten te incuberen. Gebruik de Leica DFC425 digitale camera om direct beelden vast te leggen op de Leica MZ8 microscoop. De roze gekleurde gebieden werden gekwantificeerd met behulp van Image Pro software versie 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD Image-Pro (mediacy.com)). Scanningelektronenmicroscopie werd uitgevoerd zoals hieronder beschreven.
Bacteriën die een nacht waren gekweekt, werden 1:100 verdund in Mueller-Hinton-bouillon. 200 μl van de kweek werd toegevoegd aan een steriel 0,2 μm Whatman cyclopore-membraan (Whatman, Maidstone, VK) en uitgeplaat op Mueller-Hinton-agar. De biofilmplaten werden 72 uur bij 37 °C geïncubeerd om de vorming van een volwaardige biofilm mogelijk te maken.
Na 3 dagen biofilmrijping werd een vierkant verband van 3 cm² direct op de biofilm geplaatst en gedurende 24 uur bij 37 °C geïncubeerd. Nadat het verband van het biofilmoppervlak was verwijderd, werd 1 ml PrestoBlue Cell Viability Reagent (Invitrogen, Waltham, MA) gedurende 20 seconden aan het oppervlak van elke biofilm toegevoegd. De oppervlakken werden gedroogd voordat de kleurveranderingen werden vastgelegd met een Nikon D2300 digitale camera (Nikon UK Ltd., Kingston, VK).
Bereid nachtculturen voor op Mueller-Hinton-agar, breng individuele kolonies over naar 10 ml Mueller-Hinton-bouillon en incubeer op een schudapparaat bij 37 °C (100 rpm). Na de nachtelijke incubatie werd de cultuur 1:100 verdund in Mueller-Hinton-bouillon en werd 300 µl aangebracht op een cirkelvormig Whatman Cyclopore-membraan van 0,2 µm (Whatman International, Maidstone, VK) op Mueller-Hinton-agar en gedurende 72 uur geïncubeerd bij 37 °C. De volgroeide biofilm werd op de wond aangebracht zoals hieronder beschreven.
Alle werkzaamheden met dieren werden uitgevoerd aan de Universiteit van Manchester onder een projectvergunning goedgekeurd door het Office of Animal Welfare and Ethical Review (P8721BD27) en in overeenstemming met de richtlijnen gepubliceerd door het Home Office onder de herziene ASPA van 2012. Alle auteurs hielden zich aan de aankomstrichtlijnen. Acht weken oude C57BL/6j-muizen (Envigo, Oxon, VK) werden gebruikt voor alle in vivo-onderzoeken. De muizen werden verdoofd met isoflurane (Piramal Critical Care Ltd, West Drayton, VK) en hun rug werd geschoren en gereinigd. Elke muis kreeg vervolgens een excisiewond van 2 × 6 mm met behulp van een Stiefel-biopsiepons (Schuco International, Hertfordshire, VK). Bij met biofilm geïnfecteerde wonden werd de 72 uur oude koloniale biofilm, gekweekt op het membraan zoals hierboven beschreven, onmiddellijk na de verwonding met een steriele entnaald op de dermale laag van de wond aangebracht en het membraan weggegooid. Een vierkante centimeter verbandmateriaal werd vooraf bevochtigd met steriel water om een vochtig wondmilieu te behouden. De verbanden werden direct op elke wond aangebracht en afgedekt met 3M Tegaderm-folie (3M, Bracknell, VK). Rond de randen werd Mastisol vloeibare lijm (Eloquest Healthcare, Ferndale, MI) aangebracht voor extra hechting. Buprenorfine (Animalcare, York, VK) werd toegediend in een concentratie van 0,1 mg/kg als pijnstiller. Muizen werden drie dagen na de verwonding geëuthanaseerd volgens de Schedule 1-methode. Het wondgebied werd vervolgens verwijderd, in tweeën gedeeld en bewaard.
Hematoxylinekleuring (ThermoFisher Scientific) en eosinekleuring (ThermoFisher Scientific) werden uitgevoerd volgens het protocol van de fabrikant. Het wondoppervlak en de re-epithelialisatie werden gekwantificeerd met behulp van Image Pro software versie 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD).
Weefselcoupes werden ontwasd in xyleen (ThermoFisher Scientific, Loughborough, VK), gerehydrateerd met 100-50% ethanol in oplopende concentraties en kort ondergedompeld in gedemineraliseerd water (ThermoFisher Scientific). Immunohistochemie werd uitgevoerd met behulp van de VectaStain Elite ABC PK-6104 kit (Vector Laboratories, Burlingame, CA) volgens het protocol van de fabrikant. Primaire antilichamen tegen neutrofielen NIMP-R14 (Thermofisher Scientific) en macrofagen Ms CD107b Pure M3/84 (BD Biosciences, Wokingham, VK) werden 1:100 verdund in blokkeeroplossing en toegevoegd aan het snijvlak, gevolgd door 2 antilichamen Anti-, VectaStain ABC en Vector Nova Red Peroxidase (HRP) substraatkit (Vector Laboratories, Burlingame, CA) en nagekleurd met hematoxyline. De beelden werden verkregen met behulp van een Olympus BX43 microscoop en een Olympus DP73 digitale camera (Olympus, Southend-on-Sea, VK).
Huidmonsters werden gefixeerd in 2,5% glutaraldehyde en 4% formaldehyde in 0,1 M HEPES (pH 7,4) gedurende 24 uur bij 4°C. De monsters werden gedehydrateerd met behulp van een reeks ethanoloplossingen en gedroogd in CO2 met een Quorum K850 kritischepuntdroger (Quorum Technologies Ltd, Loughton, VK). Vervolgens werden ze bekleed met een goud-palladiumlegering door middel van sputtercoating met een Quorum SC7620 mini-sputter-/gloeiontladingsysteem. De preparaten werden afgebeeld met een FEI Quanta 250 scanningelektronenmicroscoop (ThermoFisher Scientific) om het centrale punt van de wond te visualiseren.
Toto-1 jodide (2 μM) werd aangebracht op het oppervlak van de uitgesneden muizenwond en gedurende 5 minuten geïncubeerd bij 37 °C (ThermoFisher Scientific). Vervolgens werd de wond behandeld met Syto-60 (10 μM) bij 37 °C (ThermoFisher Scientific). Met behulp van een Leica TCS SP8 werden Z-stack-beelden van 15 minuten gemaakt.
Biologische en technische replicatiegegevens werden getabelleerd en geanalyseerd met behulp van Graphpad Prism V9-software (GraphPad Software, La Jolla, CA). Een eenzijdige variantieanalyse met meervoudige vergelijkingen en de post-hoctoets van Dunnett werd gebruikt om te testen op verschillen tussen elke behandeling en het niet-antimicrobiële controleverband. Een p-waarde <0,05 werd als significant beschouwd.
De effectiviteit van zilvergelvezelverbanden werd eerst in vitro beoordeeld tegen biofilmkolonies van Staphylococcus aureus en Pseudomonas aeruginosa. Zilververbanden bevatten verschillende zilverformules: traditionele zilververbanden produceren Ag1+-ionen; zilververbanden die na toevoeging van EDTA/BC Ag1+-ionen kunnen produceren, kunnen de biofilmmatrix vernietigen en bacteriën blootstellen aan zilver onder het antibacteriële effect van zilverionen15; en verbanden die geoxygeneerde zilverzouten bevatten die Ag1+-, Ag2+- en Ag3+-ionen produceren. De effectiviteit werd vergeleken met een niet-antimicrobieel controleverband gemaakt van gegelatineerde vezels. De resterende levensvatbare bacteriën in de biofilm werden gedurende 8 dagen elke 24 uur beoordeeld (Figuur 1). Op dag 5 werd de biofilm opnieuw geïnoculeerd met 3,85 × 10⁵ Staphylococcus aureus of 1,22 × 10⁵ P. aeruginosa om het herstel van de biofilm te beoordelen. Vergeleken met niet-antimicrobiële controleverbanden hadden Ag1+-verbanden een minimaal effect op de bacteriële levensvatbaarheid in Staphylococcus aureus- en Pseudomonas aeruginosa-biofilms gedurende 5 dagen. Daarentegen waren verbanden met geoxygeneerd zilver en Ag1+ + EDTA/BC-zouten effectief in het doden van bacteriën in de biofilm binnen 5 dagen. Na herhaalde inoculatie met planktonische bacteriën op dag 5 werd geen herstel van de biofilm waargenomen (Fig. 1).
Kwantificering van levensvatbare bacteriën in Staphylococcus aureus- en Pseudomonas aeruginosa-biofilms na behandeling met zilververbanden. Biofilmkolonies van Staphylococcus aureus en Pseudomonas aeruginosa werden behandeld met zilververbanden of niet-antimicrobiële controleverbanden, en het aantal overgebleven levensvatbare bacteriën werd elke 24 uur bepaald. Na 5 dagen werd de biofilm opnieuw geïnoculeerd met 3,85 × 10⁵ Staphylococcus aureus of 1,22 × 10⁵ P. Kolonies van het bacterioplankton Pseudomonas aeruginosa werden afzonderlijk gevormd om het herstel van de biofilm te beoordelen. Grafieken tonen het gemiddelde +/- standaardfout.
Om het effect van zilververbanden op de levensvatbaarheid van biofilms te visualiseren, werden verbanden aangebracht op volwassen biofilms die ex vivo op varkenshuid waren gegroeid. Na 24 uur werd het verband verwijderd en de biofilm gekleurd met een blauwe reactieve kleurstof, die door levende bacteriën wordt gemetaboliseerd tot een roze kleur. Biofilms behandeld met controleverbanden waren roze, wat wijst op de aanwezigheid van levensvatbare bacteriën in de biofilm (Figuur 2A). Daarentegen was de biofilm behandeld met het Ag-oxysol-verband voornamelijk blauw, wat aangeeft dat de resterende bacteriën op het oppervlak van de varkenshuid niet-levensvatbaar waren (Figuur 2B). Gemengde blauwe en roze kleuring werd waargenomen in biofilms behandeld met Ag1+-houdende verbanden, wat wijst op de aanwezigheid van zowel levensvatbare als niet-levensvatbare bacteriën in de biofilm (Figuur 2C), terwijl EDTA/BC-verbanden met Ag1+ overwegend blauw waren met enkele roze vlekken, wat duidt op gebieden die niet door het zilververband waren aangetast (Figuur 2D). Kwantificering van actieve (roze) en inactieve (blauwe) gebieden toonde aan dat de controlepleister 75% actief was (Figuur 2E). Ag1+ + EDTA/BC-verbanden presteerden vergelijkbaar met zuurstofrijke zilverzoutverbanden, met overlevingspercentages van respectievelijk 13% en 14%. Het Ag1+-verband verminderde de bacteriële levensvatbaarheid ook met 21%. Deze biofilms werden vervolgens geobserveerd met behulp van scanningelektronenmicroscopie (SEM). Na behandeling met het controleverband en het Ag1+-verband werd een laag Pseudomonas aeruginosa waargenomen die de varkenshuid bedekte (Figuur 2F,H), terwijl na behandeling met het Ag1+-verband weinig bacteriële cellen werden gevonden, en ook daaronder bevonden zich weinig bacteriële cellen. Collageenvezels kunnen worden beschouwd als de weefselstructuur van de varkenshuid (Figuur 2G). Na behandeling met het Ag1+ + EDTA/BC-verband waren bacteriële plaques en onderliggende collageenvezelplaques zichtbaar (Figuur 2I).
Visualisatie van Pseudomonas aeruginosa-biofilm na behandeling met zilververband. (A–D) De levensvatbaarheid van bacteriën in Pseudomonas aeruginosa-biofilms, gekweekt op varkenshuid, werd gevisualiseerd met behulp van de kleurstof PrestoBlue, 24 uur na behandeling met zilververband of niet-antimicrobieel controleverband. Levende bacteriën zijn roze, niet-levensvatbare bacteriën en varkenshuid zijn blauw. (E) Kwantificering van Pseudomonas aeruginosa-biofilms gekweekt op varkenshuid (roze stip) met behulp van scanningelektronenmicroscopie Image Pro versie 10 (FI) en behandeld met een zilververband of een niet-antimicrobieel controleverband gedurende 24 uur. Schaalbalk SEM = 5 µm. (J–M) Koloniale biofilms groeiden op filters en werden gekleurd met de reactieve kleurstof PrestoBlue na 24 uur incubatie met zilververband.
Om te bepalen of nauw contact tussen de verbanden en de biofilms de effectiviteit van de verbanden beïnvloedde, werden koloniale biofilms op een vlak oppervlak geplaatst en gedurende 24 uur behandeld met de verbanden, waarna ze werden gekleurd met reactieve kleurstoffen. De onbehandelde biofilm was donkerroze van kleur (Figuur 2J). In tegenstelling tot biofilms die behandeld waren met verbanden die geoxygeneerde zilverzouten bevatten (Figuur 2K), vertoonden biofilms die behandeld waren met verbanden die Ag1+ of Ag1+ + EDTA/BC bevatten roze kleurbanden (Figuur 2L,M). Deze roze kleuring duidt op de aanwezigheid van levensvatbare bacteriën en is geassocieerd met het hechtingsgebied binnen het verband. Deze ingenaaide gebieden creëren dode ruimtes waarin bacteriën in de biofilm kunnen overleven.
Om de effectiviteit van zilververbanden in vivo te evalueren, werden excisiewonden van muizen die geïnfecteerd waren met volwassen S. aureus- en P. aeruginosa-biofilms behandeld met niet-antimicrobiële controleverbanden of zilververbanden. Na 3 dagen behandeling toonde macroscopische beeldanalyse kleinere wonden aan bij behandeling met zuurstofrijke zoutverbanden in vergelijking met niet-antimicrobiële controleverbanden en andere zilververbanden (Figuur 3A-H). Om deze waarnemingen te bevestigen, werden de wonden geoogst en werden het wondoppervlak en de re-epithelialisatie gekwantificeerd op met hematoxyline en eosine gekleurde weefselcoupes met behulp van ImagePro-software versie 10 (Figuur 3I-L).
Het effect van zilververbanden op het wondoppervlak en de re-epithelialisatie van wonden geïnfecteerd met biofilms. (A–H) Kleine cellen geïnfecteerd met biofilms van Pseudomonas aeruginosa (A–D) en Staphylococcus aureus (E–H) na drie dagen behandeling met een niet-antimicrobieel controleverband, een zuurstofrijk zilverzoutverband, een Ag1+-verband en een Ag1+-verband. Representatieve macroscopische beelden van wonden van muizen met een Ag1+ + EDTA/BC-verband. (IL) Representatieve Pseudomonas aeruginosa-infectie, histologische coupes gekleurd met hematoxyline en eosine, gebruikt om het wondoppervlak en de epitheliale regeneratie te kwantificeren. Kwantificering van het wondoppervlak (M, O) en het percentage re-epithelialisatie (N, P) van wonden geïnfecteerd met Pseudomonas aeruginosa (M, N) en Staphylococcus aureus (O, P) biofilms (per behandelingsgroep n = 12). Grafieken tonen het gemiddelde +/- standaardfout. * betekent p = < 0,05 ** betekent p = < 0,01; Macroscopische schaal = 2,5 mm, histologische schaal = 500 µm.
Kwantificering van het wondoppervlak in wonden geïnfecteerd met Pseudomonas aeruginosa-biofilm (Figuur 3M) toonde aan dat wonden behandeld met Ag-oxyzouten een gemiddelde wondgrootte hadden van 2,5 mm², terwijl het niet-antimicrobiële controleverband een gemiddelde wondgrootte had van 3,1 mm², wat niet klopt. Dit bereikte statistische significantie (Figuur 3M). p = 0,423). Wonden behandeld met Ag1+ of Ag1+ + EDTA/BC vertoonden geen vermindering van het wondoppervlak (respectievelijk 3,1 mm² en 3,6 mm²). Behandeling met een zuurstofrijk Ag-zoutverband bevorderde de re-epithelialisatie in grotere mate dan het niet-antimicrobiële controleverband (respectievelijk 34% en 15%; p = 0,029) en Ag1+ of Ag1+ + EDTA/BC (respectievelijk 10% en 11%) (Figuur 3N).
Vergelijkbare trends in wondoppervlakte en epitheliale regeneratie werden waargenomen in wonden geïnfecteerd met S. aureus-biofilms (Figuur 3O). Verbanden met geoxygeneerde zilverzouten verminderden de wondoppervlakte (2,0 mm²) met 23% vergeleken met het controleverband zonder antimicrobiële werking (2,6 mm²), hoewel deze vermindering niet significant was (p = 0,304) (Figuur 3O). Bovendien was de wondoppervlakte in de Ag1+-behandelingsgroep licht verminderd (2,4 mm²), terwijl de wond behandeld met het Ag1+ + EDTA/BC-verband geen vermindering van de wondoppervlakte vertoonde (2,9 mm²). Zuurstofzouten van zilver bevorderden ook de re-epithelialisatie van wonden geïnfecteerd met S. aureus-biofilm (31%) in grotere mate dan die behandeld met niet-antimicrobiële controleverbanden (12%, p = 0,003) (Figuur 3P). Het Ag1+ verband (16%, p = 0,903) en het Ag+1 + EDTA/BC verband (14%, p = 0,965) vertoonden een niveau van epitheliale regeneratie dat vergelijkbaar was met de controlegroep.
Om het effect van zilververbanden op de biofilmmatrix te visualiseren, werd kleuring met Toto 1 en Syto 60 jodide uitgevoerd (Fig. 4). Toto 1 jodide is een cel-impermeabele kleurstof die gebruikt kan worden om extracellulaire nucleïnezuren, die overvloedig aanwezig zijn in de EPS van biofilms, nauwkeurig te visualiseren. Syto 60 is een cel-permeabele kleurstof die als tegenkleuring wordt gebruikt16. Waarnemingen met Toto 1 en Syto 60 jodide in wonden geïnoculeerd met biofilms van Pseudomonas aeruginosa (Figuur 4A-D) en Staphylococcus aureus (Figuur 4I-L) toonden aan dat na 3 dagen behandeling met het verband de EPS in de biofilm significant was verminderd. Dit verband bevatte geoxygeneerde zouten Ag en Ag1+ + EDTA/BC. Ag1+-verbanden zonder extra antibiofilmcomponenten verminderden de hoeveelheid celvrij DNA in wonden die waren geïnfecteerd met Pseudomonas aeruginosa aanzienlijk, maar waren minder effectief in wonden die waren geïnfecteerd met Staphylococcus aureus.
In vivo beeldvorming van wondbiofilm na 3 dagen behandeling met controle- of zilververbanden. Confocale beelden van Pseudomonas aeruginosa (A–D) en Staphylococcus aureus (I–L) gekleurd met Toto 1 (groen) om extracellulaire nucleïnezuren, een component van extracellulaire biofilmpolymeren, te visualiseren. Voor het kleuren van intracellulaire nucleïnezuren wordt Syto 60 (rood) gebruikt. P. Scanningelektronenmicroscopie van wonden geïnfecteerd met Pseudomonas aeruginosa (E–H) en Staphylococcus aureus (M–P) biofilms na 3 dagen behandeling met controle- en zilververbanden. Schaalbalk SEM = 5 µm. Schaalbalk confocale beeldvorming = 50 µm.
Scanning elektronenmicroscopie toonde aan dat muizen die waren geïnoculeerd met biofilmkolonies van Pseudomonas aeruginosa (Figuur 4E-H) en Staphylococcus aureus (Figuur 4M-P) significant minder bacteriën in hun wonden hadden na 3 dagen behandeling met alle zilververbanden.
Om het effect van zilververbanden op wondontsteking bij met biofilm geïnfecteerde muizen te evalueren, werden coupes van met biofilm geïnfecteerde wonden, behandeld met controle- of zilververbanden gedurende 3 dagen, immunohistochemisch gekleurd met antilichamen specifiek voor neutrofielen en macrofagen. Kwantitatieve bepaling van neutrofielen en macrofagen in het granulatieweefsel (Figuur 5). Alle zilververbanden verminderden het aantal neutrofielen en macrofagen in met Pseudomonas aeruginosa geïnfecteerde wonden in vergelijking met niet-antimicrobiële controleverbanden na drie dagen behandeling. Behandeling met het zuurstofrijke zilverzoutverband resulteerde echter in een grotere reductie van neutrofielen (p = <0,0001) en macrofagen (p = <0,0001) in vergelijking met de andere geteste zilververbanden (Figuur 5I,J). Hoewel Ag1+ + EDTA/BC een groter effect had op de wondbiofilm, verminderde het de neutrofiel- en macrofaagniveaus in mindere mate dan het Ag1+-verband. Matig geïnfecteerde wonden met S. aureus-biofilm werden ook waargenomen na verband met Ag (p = <0,0001), Ag1+ (p = 0,0008) en Ag1++ EDTA/BC (p = 0,0043) oxisolen in vergelijking met de controlegroep. Soortgelijke trends werden waargenomen voor neutropenie (Fig. 5K). Echter, alleen het verband met geoxygeneerd zilverzout vertoonde een significante afname van het aantal macrofagen in het granulatieweefsel in vergelijking met de controlegroep bij wonden geïnfecteerd met S. aureus-biofilms (p = 0,0339) (Figuur 5L).
Neutrofielen en macrofagen werden gekwantificeerd in wonden geïnfecteerd met Pseudomonas aeruginosa- en Staphylococcus aureus-biofilms na 3 dagen behandeling met een niet-antimicrobieel controleverband of zilververbanden. Neutrofielen (AD) en macrofagen (EH) werden gekwantificeerd in weefselcoupes gekleurd met antilichamen specifiek voor neutrofielen of macrofagen. Kwantificering van neutrofielen (I en K) en macrofagen (J en L) in wonden geïnfecteerd met Pseudomonas aeruginosa (I en J) en Staphylococcus aureus (K & L) biofilms. N = 12 per groep. Grafieken tonen het gemiddelde +/- standaardfout, significantiewaarden vergeleken met het niet-antibacteriële controleverband, * betekent p = < 0,05, ** betekent p = < 0,01; *** betekent p = < 0,001; geeft p = <0,0001 aan).
Vervolgens hebben we het effect van zilververbanden op infectie-onafhankelijke wondgenezing onderzocht. Niet-geïnfecteerde excisiewonden werden gedurende 3 dagen behandeld met een niet-antimicrobieel controleverband of een zilververband (Figuur 6). Van de geteste zilververbanden leken alleen de wonden die behandeld waren met het zuurstofhoudende zoutverband kleiner op macroscopische beelden dan de wonden die met het controleverband waren behandeld (Figuur 6A-D). Kwantificering van het wondoppervlak met behulp van histologische analyse toonde aan dat het gemiddelde wondoppervlak na behandeling met het Ag-oxysolverband 2,35 mm² bedroeg, vergeleken met 2,96 mm² voor wonden die met de controlegroep waren behandeld, maar dit verschil was niet statistisch significant (p = 0,488) (Figuur 6I). Daarentegen werd geen vermindering van het wondoppervlak waargenomen na behandeling met Ag1+ (3,38 mm², p = 0,757) of Ag1+ + EDTA/BC (4,18 mm², p = 0,054) verbanden in vergelijking met de controlegroep. Bij het Ag-oxysolverband werd een verhoogde epitheliale regeneratie waargenomen in vergelijking met de controlegroep (30% versus 22%). Hoewel dit niet significant was (p = 0,067), is het toch significant en bevestigt het eerdere resultaten. Een verband met oxysolen bevordert de re-epithelialisatie. -Epithelialisatie van niet-geïnfecteerde wonden17. Daarentegen had behandeling met Ag1+ of Ag1+ + EDTA/BC-verbanden geen effect of vertoonde een verminderde re-epithelialisatie in vergelijking met de controlegroep.
Effect van zilverhoudend wondverband op wondgenezing bij niet-geïnfecteerde muizen met complete resectie. (AD) Representatieve macroscopische beelden van wonden na drie dagen behandeling met een niet-antimicrobieel controleverband en een zilverhoudend verband. (EH) Representatieve wonddoorsneden gekleurd met hematoxyline en eosine. Kwantificering van het wondoppervlak (I) en het percentage re-epithelialisatie (J) werden berekend aan de hand van histologische doorsneden in het midden van de wond met behulp van beeldanalysesoftware (n = 11-12 per behandelingsgroep). Grafieken tonen het gemiddelde +/- standaardfout. * betekent p = <0,05.
Zilver wordt al lange tijd gebruikt als antimicrobiële therapie bij wondgenezing, maar de vele verschillende formuleringen en toedieningsmethoden kunnen leiden tot verschillen in antimicrobiële werkzaamheid 18. Bovendien zijn de antibiofilm-eigenschappen van specifieke zilvertoedieningssystemen nog niet volledig begrepen. Hoewel de immuunrespons van de gastheer relatief effectief is tegen planktonische bacteriën, is deze over het algemeen minder effectief tegen biofilms 19. Planktonische bacteriën worden gemakkelijk gefagocyteerd door macrofagen, maar binnen biofilms vormen geaggregeerde cellen extra problemen doordat ze de gastheerrespons zodanig beperken dat immuuncellen apoptose kunnen ondergaan en pro-inflammatoire factoren kunnen vrijgeven om de immuunrespons te versterken 20. Er is waargenomen dat sommige leukocyten biofilms kunnen binnendringen 21, maar niet in staat zijn bacteriën te fagocyteren zodra deze verdediging is aangetast 22. Een holistische benadering moet worden gebruikt om de immuunrespons van de gastheer tegen wondbiofilminfectie te ondersteunen. Wonddebridement kan de biofilm fysiek verstoren en het grootste deel van de microbiële belasting verwijderen, maar de immuunrespons van de gastheer kan ineffectief zijn tegen de resterende biofilm, vooral als de immuunrespons van de gastheer is aangetast. Antimicrobiële therapieën zoals zilververbanden kunnen dus de immuunrespons van de gastheer ondersteunen en biofilminfecties elimineren. De samenstelling, concentratie, oplosbaarheid en het toedieningssubstraat kunnen de antimicrobiële effectiviteit van zilver beïnvloeden. De afgelopen jaren hebben vorderingen in de zilververwerkingstechnologie deze verbanden effectiever gemaakt9,23. Naarmate de technologie voor zilververbanden zich verder ontwikkelt, is het belangrijk om de effectiviteit van deze verbanden bij de bestrijding van wondinfecties te begrijpen en, nog belangrijker, de impact van deze krachtige vormen van zilver op het wondmilieu en de wondgenezing.
In deze studie vergeleken we de effectiviteit van twee geavanceerde zilververbanden met conventionele zilververbanden die Ag1+-ionen afgeven tegen biofilms, met behulp van verschillende in vitro en in vivo modellen. We beoordeelden ook het effect van deze verbanden op het wondmilieu en infectie-onafhankelijke genezing. Om de invloed van de toedieningsmatrix te minimaliseren, bestonden alle geteste zilververbanden uit carboxymethylcellulose.
Onze voorlopige evaluatie van deze zilververbanden tegen koloniale biofilms van Pseudomonas aeruginosa en Staphylococcus aureus laat zien dat, in tegenstelling tot traditionele Ag1+-verbanden, twee geavanceerde zilververbanden, Ag1+ + EDTA/BC en geoxygeneerde zilverzouten, effectief zijn en biofilm-bacteriën binnen enkele dagen doden. Bovendien voorkomen deze verbanden de hernieuwde vorming van biofilm bij herhaalde blootstelling aan planktonische bacteriën. Het Ag1+-verband bevatte zilverchloride, dezelfde zilververbinding en basismatrix als Ag1+ + EDTA/BC, en had een beperkt effect op de bacteriële levensvatbaarheid binnen de biofilm gedurende dezelfde periode. De waarneming dat een Ag1+ + EDTA/BC-verband effectiever was tegen biofilm dan een Ag1+-verband bestaande uit dezelfde matrix en een zilververbinding, ondersteunt het idee dat extra ingrediënten nodig zijn om de effectiviteit van zilverchloride tegen biofilm te verhogen, zoals elders is gerapporteerd15. Deze resultaten ondersteunen het idee dat BC en EDTA een aanvullende rol spelen in de algehele effectiviteit van het verband en dat de afwezigheid van deze component in Ag1+-verbanden mogelijk heeft bijgedragen aan het niet aantonen van werkzaamheid in vitro. We ontdekten dat zuurstofrijke zilverzoutverbanden die Ag2+- en Ag3+-ionen produceren een sterkere antibacteriële werking vertoonden dan Ag1+ en op niveaus vergelijkbaar met Ag1+ + EDTA/BC. Vanwege het hoge redoxpotentieel is het echter onduidelijk hoe lang Ag3+-ionen actief en effectief blijven tegen wondbiofilms en daarom verdient dit verder onderzoek. Bovendien zijn er veel verschillende verbanden die Ag1+-ionen genereren die niet in dit onderzoek zijn getest. Deze verbanden zijn samengesteld uit verschillende zilververbindingen, concentraties en basismatrices, wat de afgifte van Ag1+-ionen en hun effectiviteit tegen biofilms kan beïnvloeden. Het is ook belangrijk om te vermelden dat er veel verschillende in vitro en in vivo modellen worden gebruikt om de effectiviteit van wondverbanden tegen biofilms te evalueren. Het type model dat wordt gebruikt, evenals het zout- en eiwitgehalte van de media die in deze modellen worden gebruikt, beïnvloedt de effectiviteit van het verband. In ons in vivo-model lieten we de biofilm in vitro rijpen en brachten deze vervolgens over op het huidoppervlak van de wond. De immuunrespons van de gastheermuis is relatief effectief tegen planktonische bacteriën die op de wond worden aangebracht, waardoor zich een biofilm vormt tijdens de wondgenezing. De toevoeging van een volwassen biofilm aan een wond beperkt de effectiviteit van de immuunrespons van de gastheer tegen biofilmvorming, doordat de volwassen biofilm zich in de wond kan vestigen voordat de genezing kan beginnen. Ons model stelt ons dus in staat om de effectiviteit van antimicrobiële verbanden op volwassen biofilms te evalueren voordat wonden beginnen te genezen.
We ontdekten ook dat de pasvorm van het verband de effectiviteit van zilververbanden op in vitro gekweekte biofilms en varkenshuid beïnvloedde. Nauw contact met de wond wordt als cruciaal beschouwd voor de antimicrobiële werking van het verband24,25. Verbanden die geoxygeneerde zilverzouten bevatten, kwamen in nauw contact met volwassen biofilms, wat resulteerde in een significante afname van het aantal levensvatbare bacteriën in de biofilm na 24 uur. Daarentegen bleven er bij behandeling met Ag1+ en Ag1+ + EDTA/BC-verbanden aanzienlijke aantallen levensvatbare bacteriën over. Deze verbanden bevatten hechtingen over de gehele lengte, waardoor er dode ruimtes ontstaan die nauw contact met de biofilm belemmeren. In onze in vitro-studies verhinderden deze niet-contactgebieden het doden van levensvatbare bacteriën in de biofilm. We hebben de bacteriële levensvatbaarheid pas na 24 uur behandeling beoordeeld; na verloop van tijd, naarmate het verband meer verzadigd raakt, kan er minder dode ruimte zijn, waardoor het gebied voor deze levensvatbare bacteriën kleiner wordt. Dit benadrukt echter het belang van de samenstelling van het verband, en niet alleen van het type zilver in het verband.
Hoewel in vitro-onderzoeken nuttig zijn voor het vergelijken van de effectiviteit van verschillende zilvertechnologieën, is het ook belangrijk om de effecten van deze verbanden op biofilms in vivo te begrijpen. In vivo spelen gastheerweefsel en immuunreacties een rol in de effectiviteit van de verbanden tegen biofilms. Het effect van deze verbanden op wondbiofilms werd waargenomen met behulp van scanningelektronenmicroscopie en EPS-kleuring van de biofilm met intracellulaire en extracellulaire DNA-kleurstoffen. We ontdekten dat na 3 dagen behandeling alle verbanden effectief waren in het verminderen van celvrij DNA in met biofilm geïnfecteerde wonden, maar dat het Ag1+-verband minder effectief was in met Staphylococcus aureus geïnfecteerde wonden. Scanningelektronenmicroscopie toonde ook aan dat er significant minder bacteriën aanwezig waren in wonden die met de zilververbanden waren behandeld, hoewel dit effect sterker was bij het zuurstofrijke zilverzoutverband en het Ag1+ + EDTA/BC-verband in vergelijking met het Ag1+-verband. Deze gegevens tonen aan dat de geteste zilververbanden een wisselend effect hadden op de biofilmstructuur, maar geen van de zilververbanden was in staat de biofilm volledig te verwijderen. Dit onderstreept de noodzaak van een holistische benadering bij de behandeling van biofilminfecties in wonden, bijvoorbeeld door het gebruik van zilververbanden. De behandeling wordt voorafgegaan door fysiek debridement om het grootste deel van de biofilm te verwijderen.
Chronische wonden bevinden zich vaak in een staat van ernstige ontsteking, waarbij overtollige ontstekingscellen gedurende langere tijd in het wondweefsel achterblijven, wat weefselschade veroorzaakt en de zuurstof uitput die nodig is voor een efficiënt cellulair metabolisme en functioneren in de wond.26 Biofilms verergeren deze vijandige wondomgeving door de genezing op verschillende manieren negatief te beïnvloeden, waaronder remming van celproliferatie en -migratie en activering van pro-inflammatoire cytokinen.27 Naarmate zilververbanden effectiever worden, is het belangrijk om de impact ervan op de wondomgeving en de genezing te begrijpen.
Interessant genoeg beïnvloedden alle zilververbanden de biofilmsamenstelling, maar alleen verbanden met geoxygeneerd zilverzout bevorderden de re-epithelialisatie van deze geïnfecteerde wonden. Deze gegevens ondersteunen onze eerdere bevindingen17 en die van Kalan et al. (2017)28, die aantoonden dat geoxygeneerde zilverzouten een goed veiligheids- en toxiciteitsprofiel hebben, aangezien lagere concentraties zilver effectief waren tegen biofilms.
Onze huidige studie belicht de verschillen in zilvertechnologie tussen antimicrobiële zilververbanden en de impact van deze technologie op het wondmilieu en infectie-onafhankelijke genezing. Deze resultaten verschillen echter van eerdere studies die aantoonden dat Ag1+ + EDTA/BC-verbanden de genezingsparameters van gewonde konijnenoren in vivo verbeterden. Dit kan echter te wijten zijn aan verschillen in diermodellen, meettijden en methoden voor bacteriële toepassing29. In dit geval werden wondmetingen 12 dagen na de verwonding uitgevoerd, zodat de actieve bestanddelen van het verband gedurende een langere periode op de biofilm konden inwerken. Dit wordt ondersteund door een studie die aantoonde dat klinisch geïnfecteerde beenzweren die met Ag1+ + EDTA/BC werden behandeld, aanvankelijk in omvang toenamen na een week behandeling, en vervolgens gedurende de volgende 3 weken behandeling met Ag1+ + EDTA/BC en binnen 4 weken na gebruik van niet-antimicrobiële geneesmiddelen. CMC-verbanden om de grootte van zweren te verminderen30.
Van bepaalde vormen en concentraties zilver is eerder aangetoond dat ze in vitro cytotoxisch zijn 11, maar deze in vitro-resultaten vertalen zich niet altijd in nadelige effecten in vivo. Daarnaast hebben de vooruitgang in zilvertechnologie en een beter begrip van zilververbindingen en -concentraties in verbanden geleid tot de ontwikkeling van vele veilige en effectieve zilververbanden. Naarmate de technologie voor zilververbanden zich verder ontwikkelt, is het echter belangrijk om de impact van deze verbanden op de wondomgeving te begrijpen31,32,33. Er werd eerder gerapporteerd dat de verhoogde snelheid van re-epithelialisatie overeenkomt met een verhoogd aandeel anti-inflammatoire M2-macrofagen in vergelijking met het pro-inflammatoire M1-fenotype. Dit werd opgemerkt in een eerder muizenmodel waarin zilverhydrogel-wondverbanden werden vergeleken met zilversulfadiazine en niet-antimicrobiële hydrogels34.
Chronische wonden kunnen overmatige ontsteking vertonen en er is waargenomen dat de aanwezigheid van overtollige neutrofielen schadelijk kan zijn voor de wondgenezing35. In een onderzoek met muizen met een tekort aan neutrofielen vertraagde de aanwezigheid van neutrofielen de re-epithelialisatie. De aanwezigheid van overtollige neutrofielen leidt tot hoge niveaus van proteasen en reactieve zuurstofsoorten, zoals superoxide en waterstofperoxide, die geassocieerd worden met chronische en langzaam genezende wonden37,38. Evenzo kan een toename van het aantal macrofagen, indien ongecontroleerd, leiden tot vertraagde wondgenezing39. Deze toename is met name belangrijk als macrofagen niet in staat zijn om over te schakelen van een pro-inflammatoir fenotype naar een pro-genezend fenotype, waardoor wonden de ontstekingsfase van de genezing niet kunnen verlaten40. We observeerden een afname van neutrofielen en macrofagen in met biofilm geïnfecteerde wonden na 3 dagen behandeling met alle zilververbanden, maar de afname was meer uitgesproken bij zuurstofrijke zoutverbanden. Deze afname kan een direct gevolg zijn van de immuunrespons op zilver, een reactie op een verminderde microbiële belasting, of het feit dat de wond zich in een later stadium van genezing bevindt en er daardoor minder immuuncellen in de wond aanwezig zijn. Het verminderen van het aantal ontstekingscellen in de wond kan een omgeving creëren die bevorderlijk is voor wondgenezing. Het werkingsmechanisme waarmee zilveroxyzouten infectie-onafhankelijke genezing bevorderen is onduidelijk, maar het vermogen van zilveroxyzouten om zuurstof te produceren en schadelijke hoeveelheden waterstofperoxide, een mediator van ontsteking, af te breken, zou dit kunnen verklaren en vereist verder onderzoek17.
Chronische, niet-genezende, geïnfecteerde wonden vormen een probleem voor zowel artsen als patiënten. Hoewel veel wondverbanden een antimicrobiële werking claimen, richt onderzoek zich zelden op andere belangrijke factoren die het wondmicro-omgeving beïnvloeden. Deze studie toont aan dat verschillende zilvertechnologieën een verschillende antimicrobiële werkzaamheid hebben en, belangrijker nog, verschillende effecten op de wondomgeving en de genezing, onafhankelijk van de infectie. Hoewel deze in vitro en in vivo studies de effectiviteit van deze wondverbanden aantonen bij de behandeling van wondinfecties en het bevorderen van de genezing, zijn gerandomiseerde, gecontroleerde studies nodig om de effectiviteit van deze verbanden in de klinische praktijk te evalueren.
De datasets die tijdens dit onderzoek zijn gebruikt en/of geanalyseerd, zijn op redelijk verzoek verkrijgbaar bij de corresponderende auteur.
Geplaatst op: 15 juli 2024